Médium 199

Všeobecné informácie

       Komplexné médium zložené z aminokyselín, solí, vitamínov a iných látok rozpustených vo vode.

       Používa sa ako zdroj živín pre bunkové kultúry pri výrobe vakcín, vo virológii a in vitro kultivácii (v minulosti sa používali predovšetkým médiá vyrobené z produktov zvierat alebo z tkanív zvierat). Existuje niekoľko druhov tohto média s rozdielnym využitím a mierne odlišným zložením.

       Dva zásadne rozdielne druhy Média 199 sú

• Médium 199 s Earleho soľami
• Médium 199 s Hanksovými soľami
   

       Rozdiel medzi jedným a druhým spočíva v obsahu monohydrátu dihydrogenfosforečnanu sodného (Earle) resp. v obsahu hydrogenfosforečnanu sodného a dihydrogenfosforečnanu draselného (Hanks). Rôzne verzie môžu a nemusia obsahovať sódu bikarbóna, L-glutamín, fenolovú červeň alebo nukleozidy (adenozín až uridín). Voliteľné zložky sú označené hviezdičkou (*).

       Okrem Earleho alebo Hanksových solí môže Médium 199 obsahovať aj ďalšie zložky (viď nižšie).

Earleho soli:

• chlorid sodný (kuchynská soľ)
• chlorid draselný
• chlorid vápenatý
• chlorid cholínový
• hydrogenuhličitan sodný* (= sóda bikarbóna = jedlá sóda)
• monohydrát  dihydrogenfosforečnanu sodného 
•  síran horečnatý 
• glukóza (hroznový cukor)
• L-alanín (aminokyselina)
• L-arginín (aminokyselina)
• L-asparagín (aminokyselina)
• kyselina L-aspartová (aminokyselina)
• L-cysteín (aminokyseline)
• sodná soľ L-cystínu (aminokyseliny)
• kyselina L-glutámová (aminokyselina) - jej sodnou soľou je glutaman sodný
• L-glutamín* (aminokyselina)
• glycín (aminokyselina)
• L-histidín (aminokyselina)
• L-izoleucín (aminokyselina)
• L-leucíne (aminokyselina)
• L-lyzín (aminokyselina)
• L-metionín (aminokyselina)
• L-fenylalanín (aminokyselina)
• L-prolín (aminokyselina)
• L-seríne (aminokyselina)
• L-treonín (aminokyselina)
• L-tryptofán (aminokyselina)
• sodná soľ L-tyrozínu (aminokyseliny)
• L-valín (aminokyselina)
• sodná soľ fenolovej červene*
• tiamín (vitamín B₁)
• riboflavín (vitamín B₂)
• nikotínamid (vitamín B₃)
• vápenatá soľ kyseliny pantoténovej (vitamínu B₅)
• pyridoxal (vitamín B₆)
• biotín (vitamín B₇)
• inozitol (vitamín B₈)
• kyselina listová (vitamín B₉)
• kobalamín (vitamín B₁₂)
• kyselina askorbová (vitamín C)
• kyselina α-lipoová
• sodná soľ kyseliny pyrohroznovej
• adenozín*
• cytidín*
• guanozín*
• tymidín*
• uridín*
• deoxyadenozín*
• deoxycytidín*
• deoxyguanozín*

Hanksove soli

• chlorid sodný (kuchynská soľ)
• chlorid draselný
• chlorid vápenatý
• chlorid cholínový
• hydrogenuhličitan sodný* (sóda bikarbóna, jedlá sóda)
• hydrogenfosforečnan sodný
• dihydrogenfosforečnan draselný
• síran horečnatý
• glukóza (hroznový cukor)
• L-alanín (aminokyselina)
• L-arginín (aminokyselina)
• L-asparagín (aminokyselina)
• kyselina L-aspartová (aminokyselina)
• L-cysteín (aminokyseline)
• sodná soľ L-cystínu (aminokyseliny)
• kyselina L-glutámová (aminokyselina) - jej sodnou soľou je glutaman sodný
• L-glutamín* (aminokyselina)
• glycín (aminokyselina)
• L-histidín (aminokyselina)
• L-izoleucín (aminokyselina)
• L-leucíne (aminokyselina)
• L-lyzín (aminokyselina)
• L-metionín (aminokyselina)
• L-fenylalanín (aminokyselina)
• L-prolín (aminokyselina)
• L-seríne (aminokyselina)
• L-treonín (aminokyselina)
• L-tryptofán (aminokyselina)
• sodná soľ L-tyrozínu (aminokyseliny)
• L-valín (aminokyselina)
• sodná soľ fenolovej červene*
• tiamín (vitamín B₁)
• riboflavín (vitamín B₂)
• nikotínamid (vitamín B₃)
• vápenatá soľ kyseliny pantoténovej (vitamínu B₅)
• pyridoxal (vitamín B₆)
• biotín (vitamín B₇)
• inozitol (vitamín B₈)
• kyselina listová (vitamín B₉)
• kobalamín (vitamín B₁₂)
• kyselina askorbová (vitamín C)
• kyselina α-lipoová
• sodná soľ kyseliny pyrohroznovej
• guanozín*
• adenozín*
• cytidín*
• uridín*
• tymidín*
• deoxyadenozín*
• deoxycytidín*
• deoxyguanozín*

Ďalšie zložky

• octan sodný
• nonahydrát dusičnanu železitého
• xantín sodný
• hypoxantín
• ribóza
• deoxyribóza
• adenozín-trifosforečnan disodný
• adenozín-fosforečnan
• polysorbát 80 (Tween 80)
• cholesterol
• redukovaný L-glutatión

Bezpečnosť

       Príbalový leták neudáva, ktorý druh sa vo vakcíne nachádza. Z viacerých druhov média 199 sú dostupné bezpečnostné údaje napríklad k týmto:

• Medium 199 w/Hanks’ Salts w/L-Glutamine:
  Môže byť škodlivé pri požití, môže dráždiť pokožku, oči, sliznice a horné dýchacie cesty. Úplné toxikologické informácie ešte treba preveriť.
  http://www.biowest.net/media/l0330s__040727700_1032_16082012.pdf
  úplné zloženie tu:
  http://www.biowest.net/media/l0330c__080983700_0823_15072014.pdf
• Medium 199 w/ Earle`s Mod. Salts w/ L-Glutamine w/1.25g/l Sodium Bicarbonate
  Môže byť škodlivé pri požití, môže dráždiť pokožku, oči, sliznice a horné dýchacie cesty. Úplné toxikologické informácie ešte treba preveriť.
  http://www.biowest.net/media/l0355s__049302400_1032_16082012.pdf
  úplné zloženie tu:
  http://www.biowest.net/media/l0355c__098440500_0823_15072014.pdf

Zdroje a viac informácií:

• http://www.sigmaaldrich.com/life-science/cell-culture/classical-media-salts/medium-199.html
• http://www.novaccine.com/vaccine-ingredients/results.asp?sc=60
• http://www.biowest.net/eu/index.php?pg=Cell_Culture_Medium_Products_List&num_cat=20&cat=Cell%20Culture%20Medium&menu=off#

Vypracovali:

• Lenka (výber a preklad)
• Ing. Marián Fillo (preklad zloženia a grafická úprava - takmer dve hodiny čistého času)